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液氮超冷箱设备在线播放_小型液氮降温设备(2024年12月免费观看)

内容来源：网络红人排行榜所属栏目：导读更新日期：2024-11-29

液氮超冷箱设备

冰冻切片全攻略：从零开始到荧光显微镜观察 𐟧Š 实验材料准备新鲜组织 H2O2 酒精丙酮 PBS DAPI工作液中性树胶 OCT 速冻架恒冷箱切片机烘箱荧光显微镜 𐟔ꠥ–材尽快获取新鲜组织，以防止死后变化。 ❄️ 速冻将组织块放在软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。如果组织块小，可以加OCT包埋剂浸没，然后放入盛有液氮的小杯内。当小盒底部接触液氮时，开始气化沸腾，保持原位约10-20秒，组织迅速冰结。制成冻块后，放入恒冷箱切片机进行冰冻切片。如果需要保存，用铝箔或塑料薄膜封包，立即放入-80℃冰箱。 𐟓Œ 固定在样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织放在上面，4℃冰箱预冷5-10分钟。取下组织，放在锡箔或玻片上，样品托速冻。将组织放在样品托上，再加一层OCT胶，覆盖完全，速冻30分钟。 𐟔ꠥˆ‡片使用恒温冰冻切片机，置于低温密闭室内，切片不受外界温度影响。切片时，低温室内温度保持在-15℃ ~ -20℃，温度过低组织易破碎。切片后，室温放置30分钟，入4℃丙酮固定5-10分钟，烘箱干燥20分钟。用PBS洗5分钟，重复3次。进行抗原热修复，微波热修复或室温自然冷却。用3%H2O2孵育5-10分钟，消除内源性过氧化物酶活性。 𐟌ˆ 免疫荧光染色冰冻切片室温晾干15分钟，用含10%正常山羊血清的PBS封闭1小时。滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，覆盖组织面。将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。第二天，将湿盒放到37℃回温1小时，回收一抗，切片放入小染缸PBS冲洗。滴加用PBS稀释好的二抗（避光），置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5分钟，重复3次。滴加DAPI工作液染核，室温10-20分钟（工作浓度0.1%染色15分钟）。回收DAPI，滴加5-10抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片。切片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。希望这份详细的冰冻切片指南能帮助你顺利完成实验！𐟔좜耀

冰冻切片全攻略：从新手到高手 𐟧Š 实验材料新鲜组织 H2O2 酒精丙酮 PBS DAPI工作液中性树胶 OCT 速冻架恒冷箱切片机烘箱荧光显微镜 𐟔ꠥ–材尽快采取新鲜材料，防止组织死后变化。 ❄️ 速冻将组织块平放在软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。如果组织块小，可以适量加入OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。当盒底部接触液氮时开始气化沸腾，此时保持小盒原位，不要浸入液氮中，大约10-20秒组织即迅速冰结成块。制成冻块后，置入恒冷箱切片机进行冰冻切片。如果需要保存，快速用铝箔或塑料薄膜封包，立即放入-80℃冰箱贮存备用。 𐟓Œ 固定在样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织置于其上，4℃冰箱预冷5-10分钟让OCT胶浸透组织。取下组织置于锡箔或玻片上，样品托速冻。将组织置于样品托上，再添一层OCT胶，以完全覆盖为宜，速冻架（PE）上30分钟。 𐟔ꠥˆ‡片使用恒温冰冻切片机，将其置于低温密闭室内，切片时不受外界温度和环境影响，可连续切薄片至5-10。切片时，低温室内温度以-15℃ ~ -20℃为宜，温度过低组织易破碎，抗卷板的位置及角度要适当，载玻片附贴组织切片，切勿上下移动。切好室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定5-10分钟，烘箱干燥20分钟。PBS洗5分钟㗳次。进行抗原热修复，微波热修复也可，室温自然冷却。可用3%H2O2孵育5-10分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。 𐟌ˆ 免疫荧光染色冰冻切片室温晾干15分钟，用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时。滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（可以均匀覆盖组织面，保证过程中不会使组织干涸）。将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。第二天先将湿盒放到37℃回温1小时，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5分钟㗳次。滴加DAPI工作液染核，室温10-20分钟（工作浓度0.1%染色15分钟）。回收DAPI，滴加5-10抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察拍照。做好的切片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。

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