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如何安全复苏冻存细胞:详细指南 复苏冻存细胞是一个需要小心操作的过程,以下是详细的步骤和注意事项: 操作步骤 检查冻存目录:首先,确认你要复苏的冻存管的位置。 准备材料收集所有必要的材料,包括培养基,并标记好培养瓶。 取出冻存管:从冻存罐中取出冻存管,检查标签以确保是正确的。如果小管没有完全浸没在液氮中,将其放入塑料除菌水桶内的37℃烧杯中。注意不要让水超过管帽,以免增加污染风险。 复苏冻存管导将冻存管从液氮中取出时,必须穿实验衣和戴手套。如果冻存管浸没在液氮中,还需要戴面罩或护目镜。复苏时使用带盖的塑料水桶可以控制可能的爆炸。 检查细胞类型:复苏时再次检查标签,确认是所需的细胞类型。用70%乙醇彻底擦洗冻存管,然后在超净工作台内打开冻存管。 转移细胞毼用1ml吸管将冻存管内的细胞转移至培养瓶中。 加入培养基缓慢加入培养基至细胞悬液中,以每2分钟10ml的速率进行滴加。开始时逐滴加入,然后可以加快速度,逐渐稀释细胞和细胞保护剂。 离心去除保护剂:如果需要通过离心去除细胞保护剂: 在离心管或常规容器内缓慢稀释细胞。 以100g离心2分钟。 弃去含有细胞保护剂的上清培养液。 用新鲜培养基重新悬浮细胞。 接种入培养瓶。 测定细胞存活率⯼冻存管内残留物可用萘黑或台盼蓝染色,以测定细胞的存活率。 24小时后检查: 贴壁单层细胞:根据预测密度(个细胞/cmⲯ细胞照片,确认细胞是否贴壁,估计细胞存活率。 悬浮生长的细胞:检查外观(清晰的细胞质,缺乏细胞颗粒),稀释至常规的接种浓度。如果进行细胞技术,并估计细胞存活率后,可以将细胞稀释至常规存活细胞接种浓度。 注意事项 穿实验衣和戴手套䯼将冻存管从液氮中取出时,必须穿实验衣和戴手套。如果冻存管浸没在液氮中,还需要戴面罩或护目镜。储存在液氮中的冻存管可能吸入液氮,复苏时可能发生剧烈爆炸。 检查冻存管:塑料冻存管在使用前要仔细检查,以防管壁破裂或螺口不配套造成密封不严。 DMSO处理:用DMSO作为冻存保护剂时,用前应先将冻存液在4℃预冷,解冻后应马上洗去保护剂。 通过以上步骤和注意事项,你可以安全、有效地复苏冻存细胞。
大蒜保鲜妙招:让香味更持久 大蒜不仅是一种常见的调味品,还具有多种药用价值。想要让大蒜的新鲜度更持久?这里有一些实用的保存方法: 冷冻保存法 将大蒜掰成一瓣一瓣,不剥皮,放入保鲜盒中。 选择冷冻或冷藏保存,冷冻可保存一个月,冷藏和常温可保存三周。 冷冻后的大蒜虽然会变软,但仍然可以用来烹饪调味。 冷冻大蒜切碎后,放入油中煸炒,有助于提升缓解疲劳的效果。 解冻时无需解冻,可直接食用。冷冻大蒜从冷冻室取出后,放置片刻,水分会增多,香味会变淡。 𖠨 制保存法 将大蒜根部切除,剥去皮,放入密封罐中。 倒入足够量的酱油,如果喜欢糖醋口味,可以加入适量的白砂糖和陈醋。 腌制后的大蒜可以放入冷藏室,保存1~2个月。 通过这些方法,你可以更好地保存大蒜,让它的香味和营养价值得以保持。
细胞复苏指南:从冻存到复苏的详细步骤 ### 细胞复苏的原理 细胞复苏,听起来有点像是科幻小说里的情节,其实就是把那些在液氮或者-70℃冰箱里“冬眠”的细胞唤醒,让它们重新开始生长。这个过程有点像是从冷冻状态中解冻,然后让细胞恢复正常的形态和生化反应。关键是要快,要“慢冻快融”,这样才能避免水分进入细胞形成冰晶,影响细胞的存活。 细胞复苏的实验步骤 스𝐩取出冻存管:首先,从液氮罐里取出冻存管,放在-80℃冰箱里数分钟,然后迅速放入37℃的水浴锅中,不停地摇动,让它在2分钟内快速融化。注意不要把冻存管的管口没入水浴中,避免污染。这个过程一般会有大约25%的细胞死亡率。 解冻后的处理:完全融化后,用75%的酒精擦拭冻存管外壁进行杀菌。打开盖子,取出细胞悬液,缓慢加入到有培养液的T25或T75培养瓶中,继续在37℃、5%CO2条件下培养。如果细胞需要去除冷冻保护剂,可以用移液枪将细胞悬液注入15mL无菌离心管中,再加5ml完全培养基,根据细胞类型选择合适的离心速度,低速离心5分钟,弃去上清,加入2-3mL预热的完全培养基,轻轻吹匀,保证细胞完全重悬。 接种培养:用培养液适当稀释后,将重悬的细胞接种到培养皿或T25或T75的培养瓶中,继续在37℃、5%CO2条件下培养。24小时后更换新鲜培养基,去除死细胞。三天可进一次换液,当细胞长到有80-90%汇合时进行传代。 细胞复苏的注意事项 ⚠️ 防护措施:取冻存细胞时要戴好防冻手套和护目镜。如果冻存管密封不严,液氮可能会被吸入,解冻时气温急剧上升可能导致爆炸。 水浴操作:将细胞放入水浴中复苏时,用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动,使其受热均匀,速度越快越好,这样可以最大限度的保存细胞活力,并防止水浴锅的水进入细胞冻存管造成细胞污染。 无菌操作:打开细胞冻存管之前要用酒精棉球消毒并晾干。整个复苏过程在4℃冰盒中进行,以减少冷冻保护剂对细胞的毒性。 解冻时间:解冻时间要在2分钟内完成,且整个过程尽量避免吹打细胞产生气泡,导致细胞复苏后的生长状态不佳。 如何避免冻存管爆炸 助择高质量的冻存管:选择质量好的进口内旋冻存管,拧紧盖子,防止液氮进入管内。液氮罐里的细胞留种用,平时常用的细胞放在-80℃冰箱。 取细胞时的防护:取细胞时带好手套和防护眼镜,准备好镊子,避免手直接接触冻存管造成手冻伤或炸伤。 取出细胞的步骤:从液氮里取出细胞时,先在液氮罐上面的蒸汽里放一会,然后再拿出来,将冻存盒残余的液氮流到罐内,避免拿出时冻伤,也避免细胞从液氮迅速升到室温发生爆炸。 希望这些小贴士能帮到你,让你的细胞复苏过程更加顺利!ꀀ
注意!做饭的人一定要收藏起来: 今天给大家分享一波超实用的厨房保鲜秘籍,让你的食材新鲜度up up,烹饪效率max max! 1.生姜冷冻真有用!生姜丢进冷冻室,随用随取,硬邦邦的姜块秒变好切,再也不怕浪费! 2.大蒜保鲜,剥好的蒜瓣装进密封罐,冷藏起来,每次拿都是满满的新鲜感,炒菜调味全靠它,美味不打折! 3.洋葱放网袋里一挂,空气流通不潮湿,远离发芽变软,保持脆甜口感,沙拉、炖菜都爱它! 4.土豆堆里放个苹果,天然防发芽剂,再也不怕囤货变绿薯,营养美味两不误! 5.香菜冷冻锁鲜,洗净晾干切小段,密封袋一装冷冻起来,随时取用,新鲜味道如初见,拌面炒菜都提香! 6.小葱切碎冷冻保存,烹饪时直接撒一把,省时又省力,厨房小白也能秒变大厨! 7.干辣椒保存,密封袋装好,干燥通风处一放,香辣味长久留存,辣炒、炖肉全靠它提味! 8.大米防虫,几瓣大蒜来护航,大米再也不怕生虫,每一粒都干净卫生,吃得放心! 9.面粉储存,密封容器装起来,阴凉干燥处放好,远离潮湿结块,烘焙甜点随时待命! 10.食用油避光存,别让油烟味伴你眠,食用油记得放避光处,延长寿命防氧化,健康烹饪每一天! 好啦,今天的厨房小课堂就到这里,是不是超级实用呢?当然想要你的厨房生活更加井井有条少不了收纳保鲜盒,马上双十一,厨房保鲜盒这也太值了!材料是优质PP材质,耐磨耐用,自带盖密封性好,吃剩的饭菜或者鲜嫩的蔬果放入其中,都能保持物品新鲜度!外观设计精致,时尚美观,大容量还能极大地节省空间,一盒多用,五谷杂粮、零食调料都能收纳,再也不担心冰箱杂乱无章了!
辅食做多了?教你如何巧妙保存!𒊥辅食真的是一门学问,尤其是当你一不小心做多了的时候。别担心,我来教你几招,保证你的辅食新鲜又美味。 蔬果类辅食:现做现吃,冷藏冷冻两相宜 蔬果类辅食做起来简单,但最好还是现做现吃。如果实在吃不完,可以选择冷藏或者冷冻。冷藏的话可以放1-2天,冷冻的话能放6个月左右。这样宝宝随时都能吃到新鲜的食物啦! 主食类辅食:一次性多做点,冷冻更方便 像面条、饺子、馄饨、包子这些主食,做起来稍微麻烦点,但可以一次性多做点。吃不完的冷冻起来,能放3-6个月呢!这样下次宝宝饿了,随时都能有美味的主食吃。 肉泥类辅食:费时费火,但保存更长久鰟𒊊肉泥类辅食做起来比较费时费火,所以很多妈妈都会一次性做出好几顿的量。一般情况下,冷藏可以放2天左右,冷冻可以放3个月左右。这样既能保证食物的新鲜,又能节省时间。 如何选择储存工具? 市面上有很多种辅食储存工具,比如储存盒、储存格、储存罐等,材质也有硅胶、塑料和玻璃的。我个人推荐硅胶储存格,像冰格那样的,冻成冰格后用手从下面轻轻一推就能取出食物,比普通的塑料冰格方便多了。玻璃材质的储存罐也很实用,安全且密封性好。如果容器密封性不好,建议先用保鲜膜包裹起来再储存,这样不会吸附其他异味。 市售成品辅食的储存方法䊊如果妈妈们没有时间自制辅食,可以购买市售的成品辅食。不同的成品辅食在储存方法和时间上区别较大,最好按照说明来储存。开封后需要在规定时间内食用完,吃不完的要扔掉,不要再给宝宝吃,否则容易引起腹泻、呕吐等问题。 加热方式也很重要尟𓊊冷冻后的辅食如何加热,对口感的影响非常大。常见的有微波炉和蒸两种方式。如果是用微波炉加热,食物的味道会和刚做出来的时候差别很大,口感大打折扣。如果是用蒸的方式加热,食物的味道和刚出来的时候差别很小。所以虽然蒸比微波炉加热麻烦点,但为了让宝宝吃得更开心,妈妈们还是麻烦点吧! 希望这些小技巧能帮到你,让你的宝宝吃得开心,妈妈也省心!
笋子保存大法来啦! 子季节到啦!为了留住美味,教你几招保存方法。 晒干法: 只晒笋衣和尖尖,这样更嫩哦!泡发时应该会更简单。可惜天气不给力,只晒了一点点 。 ❄️冷冻保存法: 笋子扒皮洗净,切半或四半,加盐焯水15-25分钟。捞出过凉水,晾干水分后装袋塑封,冷冻起来就好啦! 맽头法: 罐头瓶要煮一下消毒哦!笋子切片或滚刀,加水煮30秒。然后装进玻璃罐,扣上盖子不拧紧,上锅蒸15-30分钟。据说冷藏能保存一年呢! 𖩅𘧬法: 玻璃瓶要无水无油哦!笋子洗净切块,塞进瓶子里,倒入纯净水盖过笋。然后拧紧盖子,等着发酵就好啦! 笋法: 笋子切片加盐焯水,过凉水洗净后控干水分。珐琅锅预热加油,炒糖色后倒入笋片翻炒。再加生抽、耗油、老抽、八角香叶和干辣椒,加水盖盖子焖煮40分钟左右。尝一下咸淡后加盐,关火继续焖30分钟就好啦! ⩦菇笋丁肉酱法: 准备笋丁、香菇丁和肉沫。先不放油炒干笋丁水分备用。然后加油炒蒜末,加入瘦肉和香菇翻炒。再加生抽、耗油、一点点老抽和糖,倒入泡干香菇的水大火烧开后慢炖至水份基本没有。尝一下咸淡后根据自己口味加盐、糖、藤椒油和香油。最后盛出部分不辣的,加上辣椒油就可以享用啦!不能及时吃完的话就装玻璃瓶里蒸一下真空放凉冷藏保存哦! 包子法: 包两种馅的包子:笋丁酱肉包和笋丁香菇肉包。用一发面团包好馅后就可以上锅蒸啦!享受美味吧!
实验室液氮使用指南:安全操作与应急处理 在实验室中,液氮的使用至关重要,但同时也存在潜在的安全风险。本文将详细介绍液氮使用中的常见错误操作和突发情况,并提供一些实用的安全建议,帮助大家规范操作,确保实验安全。 력灩误操作 未盖紧盖塞:液氮罐的盖塞通常留有一定缝隙,以允许气体排出。如果盖塞被堵塞,液氮气化时气体无法及时排出,可能导致爆炸。因此,使用液氮罐时千万不要堵塞盖塞。 不记录存放位置:每次寻找冻存管都会费时费力。建议在冻存管上标记清楚细胞的具体信息(如细胞名称、代数、来源、事件、冻存液种类),并在专用记录本上记录存放位置。 ⚠️ 突发情况 冻存管炸裂:当冻存管浸入液氮中时,液氮会渗入管内。取出冻存管时,液态氮挥发导致气体体积迅速膨胀,如果气体无法及时排出,会引起冻存管爆炸。 冻存管散落在液氮罐中:此时不要慌张,可以先将所有冻存盒和冻存架取出,转移至另一冻存罐后,将液氮倒出,同时取出冻存管。如果没有多余的冻存罐,且能相对看见散落冻存管时,可用长镊子尝试盲取。 砩🥅冻存管炸裂的小技巧 选用气密性好的液相冻存管。 将冻存管保存在液氮气态层,有效防止液氮进入冻存管。但注意液氮罐中只能存储少量液氮,需要经常添加液氮。 冻存细胞时多加入一些冻存液,比如在2ml的冻存管加入1.8ml的冻存液,保留较少的气体空间。 使用冻存管套,隔绝冻存管与液氮,避免液氮直接接触冻存管而渗入管内。 采用质量好的内旋式冻存管,因为它相对液氮渗入少,气体能及时排出。如果不确定是否为内旋式,可以水平放置冻存管,液氮流出后再打开冻存管。 通过以上安全常识,大家可以更好地规范实验操作,确保实验室安全。祝大家实验顺利,平安健康!
猫咪自制熟食全攻略:从食材到制作方法 𑠧륒ꥁ奺𗯼从自制熟食开始! 頩㟦准备: 鸡胸肉:超市和某团优选,冰箱常备,猫咪超爱水煮鸡胸肉,煮熟后切成小块喂食。 鸡肝:某团优选,价格实惠,但解冻后血水多,腥味较重。 鸡胗、鸭胗:某团优选,清洗时要仔细,绞成肉泥后会有筋膜。 猪肉:菜市场购买新鲜,猪肾要去除白色筋膜,煮熟后有异味,建议不加。 鸭肉:超市和某团优选较难买到鸭胸肉,鸭腿肉去骨代替,去骨过程较麻烦,建议淘宝购买鸭胸肉。 牛肉:淘宝购买人吃的板腱,肥肉要去除,绞成肉泥后仍有筋膜。 鱼肉:某团优选,可购买冰冻的马鲛鱼和青花鱼。 料准备: 玻璃罐:耐高温,可直接蒸煮。 自封袋:分装好的肉类,冷冻保存。 猪脑盒:绞好的肉泥,冷冻保存。 添加剂: 碳酸钙、碘化钾、锰、牛磺酸、鱼油、复合维生素B、维生素E:必备。 洋车前子壳粉:帮助排毛。 布拉迪益生菌:调理肠道菌群。 滑榆皮粉:修复肠胃黏膜。 制作方法: 将肉类食材绞成肉泥,加入添加剂,搅拌均匀。 将混合好的肉泥装入玻璃罐中,放入电饭锅保温。 晚上睡前放入电饭锅,早上起来即可食用。 一罐约装120g肉泥,四罐的量可供三天食用。 观察效果: 食用一周熟自制后,猫咪身体明显壮实,毛发光亮,掉毛减少。 尿团变大,便便不再软便,肠道健康状况改善。 持续观察: 计划继续食用一段时间,并带猫咪复查肝脏问题,确保猫咪健康。
务必收藏!厨房达人必备的小技巧: 1、保鲜生姜:将生姜冷冻保存,随取随用,方便快捷,还能保持其口感和质地。 2、大蒜保鲜法:将剥好的大蒜放入密封罐中冷藏,随时使用,蒜瓣新鲜完整。 3、洋葱保存技巧:将洋葱放在网袋中悬挂,能够延长其保存时间,防止发芽变软。 4、土豆苹果搭配:将土豆和苹果放在一起,能有效防止土豆发芽。 5、香菜冷冻保存:将洗净的香菜晾干水分后切成小段,放入密封袋冷冻保存,使用时无需解冻,口感依旧。 6、葱花冷冻保存:将小葱切成葱花后冷冻保存,烹饪时直接取用,方便快捷。 7、干辣椒保存:用密封袋装好干辣椒,放在干燥通风处,长时间保持香辣味。 8、大米防虫法:在大米中放入几瓣大蒜,能有效防止大米生虫。 9、面粉储存:用密封容器储存面粉,放在阴凉干燥处,避免受潮结块。 10、食用油保存:不要将食用油放在炉灶边,应放在避光处,可防止氧化变质。#深度好文计划# #上热门#
🥆쨙륤草的储存秘诀쨙륤草是一种珍贵的滋补品,正确的保存方法能确保其营养价值和品质不受损失。以下是几种有效的保存方法: 短时间存储(一个月内食用完) 将冬虫夏草密封在塑料袋中,确保容器底部撒上一层花椒以防虫蛀。 将密封好的冬虫夏草放在花椒上,最后密封容器,置于阴凉干燥处。 长时间存储(3个月内食用完毕)❄️ 密封放冰箱冷藏保存,近期3个月内不打算食用的可密封放冰箱冷冻保存。 保存期限可达2年,但超过2年后营养流失会增多,建议在2年内食用完。 密封存放抦 论是常温存放还是冷藏、冷冻保存,都要确保冬虫夏草密封好,以防受潮、发霉。 可以使用密封袋或密封瓶罐,长时间保存时可在容器内放置干燥剂。 避免频繁改变环境❄️➡️ 不要频繁从冷冻中拿出又放回,这样会使冬虫夏草受潮并影响其营养价值。 每次从冷冻中取出的虫草解冻后必须一次食用完。 受潮处理篸 如果发现冬虫夏草受潮,应立即拿到太阳下暴晒或阴凉处快速风干。 霉变处理꯸ 如果发现冬虫夏草霉变,应判断霉变程度。 若霉变严重,虫体内部发黄或发黑,则不能食用。 若霉变程度不大,可将虫草上的毛刷掉,用高度白酒洗干净后放在太阳下晾晒后可继续使用。 通过这些简单的步骤,您可以确保冬虫夏草的新鲜度和营养价值,随时享受其带来的健康益处。
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因此,有冻存生物样本需求的专业人员,在发现罐内液氮低于一定限度时
组织,器官,冻精等)不是直接浸没在液氮中,而是存放在专门设计的冻存架
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掉进实验室液氮罐里的冻存盒怎么拿出来?
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所以,在使用液氮罐冻存生物样本时,需要随时注意其中的液氮含量
0ml冻存管的数量来命名,有四个型号,分别是cryobank2400,cryobank3600
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保存冻精,用多大口径的液氮罐比较合适?
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储存型静态冻存生物样本使用,不适合远距离运输;液氮罐有储存和运
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所以,在使用液氮罐冻存生物样本时,需要随时注意其中的液氮含量
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