液氮生物冰箱权威发布_液氮到底有多可怕(2024年11月精准访谈)
细胞冻存复苏,活力持久秘诀! ### 背景知识 𑊊在细胞培养的过程中,传代和日常维护需要大量的时间和资源。细胞一旦离开活体环境,其生物特性会逐渐发生变化,随着传代次数的增加和体外环境的变化,这些变化会越来越显著。因此,及时进行细胞冻存是非常必要的。细胞在-70℃冰箱中可以保存一年之久,而在液氮中(-196℃)理论上可以无限期保存。 原理 슊细胞冻存和复苏的基本原则是“慢冻快融”。实验证明,这种方法可以最大限度地保存细胞的活力。目前,细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜(DMSO)作为保护剂。这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻,可以使细胞内的水分渗出细胞外,减少冰晶的形成,从而减少冰晶对细胞的损伤。复苏细胞时,应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。 操作步骤 材料准备 ️ 仪器 净化工作台 离心机 恒温水浴箱 冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 倒置相差显微镜 培养箱 液氮冰箱 玻璃器皿 吸管(弯头、直头) 培养瓶 玻璃瓶(250ml、100ml) 废液缸 塑料器皿 吸头 枪头 胶塞 移液管(10ml) 15ml离心管 冻存管(1~2ml) 其他物品 微量加样枪 红血球计数板 记号笔 医用橡皮膏 移液枪 试剂 D-Hanks液 小牛血清 培养液 双抗(青霉素、链霉素) 胰蛋白酶(0.08%) 1NHCl 7.4%NaHCO3 DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油 操作步骤 冻存细胞: 用D-Hanks液清洗细胞,去除培养基。 加入胰蛋白酶消化细胞,使其完全脱离培养瓶。 将消化后的细胞转移至离心管中,离心后弃去上清液。 加入含有DMSO或甘油的保护剂,轻轻吹打均匀。 将细胞悬液分装至冻存管中,标记后放入程序降温盒中。 将程序降温盒放入-70℃冰箱中,逐步降温至-196℃后转移至液氮罐中。 复苏细胞: 从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中快速融化。 将融化后的细胞悬液转移至离心管中,离心后弃去上清液。 加入适量D-Hanks液重悬细胞,进行细胞计数和活力检测。 将细胞转移至培养瓶中,加入新鲜培养基进行培养。 注意事项 ⚠️ 所有操作需在无菌条件下进行,确保实验安全。 冻存过程中要注意缓慢降温,避免冰晶形成。 复苏过程中要快速融化,减少胞内再结晶的形成。
줸槔物实验室必备设备清单抦⧴⧔物学的奥秘,离不开先进的实验室设备。对于中学生物实验室,以下是一些必不可少的设备清单: 젪*基础生物技术实验室**: 1️⃣ 冷藏冰箱与超低温冰箱 2️⃣ 涡旋混匀仪 3️⃣ 金属浴 4️⃣ 样本破碎/研磨仪器 5️⃣ 自动化移液器 6️⃣ 离心机 7️⃣ 核酸自动提取仪器 8️⃣ 紫外分光光度计 9️⃣ 荧光定量PCR仪器 凝胶成像与水平电泳设备 젪*合成生物学相关实验室**: 1️⃣ 二氧化碳培养箱 2️⃣ 超级工作台或生物安全柜 3️⃣ 组织解离仪器 4️⃣ 细胞计数仪 5️⃣ 普通显微镜与荧光显微镜 6️⃣ 单细胞挑选设备 7️⃣ 干燥箱 8️⃣ 超纯水设备 9️⃣ 低温冰箱与超低温冰箱 细胞储存器如液氮罐等 *蛋白类实验室**: 1️⃣ 样本破碎研磨仪器 2️⃣ Western Blot设备 3️⃣ 化学发光成像仪器 4️⃣ 电泳转印设备 5️⃣ 蛋白纯化设备 6️⃣ 酶标仪 7️⃣ 质谱仪 8️⃣ 生化分析仪 9️⃣ 干燥箱与超纯水设备 低温冰箱与超低温冰箱 **微生物实验室**: 1️⃣ 超净工作台与生物安全柜 2️⃣ 各类培养箱,如生化培养箱、霉菌培养箱等 3️⃣ 天平,用于精确测量微生物样品 4️⃣ 微生物均质仪与菌落计数仪器 5️⃣ 高压灭菌锅,确保实验环境无菌 6️⃣ 普通显微镜、荧光显微镜等观察设备 7️⃣ PCR仪器与电泳设备,用于基因分析 8️⃣ 纯化设备与摇床,用于微生物的培养与纯化 9️⃣ 纯水装置与生物显微镜,确保实验条件纯净 冷冻干燥机与菌落挑选仪器,用于微生物的长期保存与挑选
冻存管内旋和外旋的区别,你知道吗? 冻存管分为内旋和外旋两种类型,它们在设计和使用上有一些关键区别。让我们来详细了解一下这两种冻存管的特点吧! 外旋式冻存管 外旋式冻存管主要用于冰箱中冻存样本。它的外旋盖设计有一个螺纹盖,这样可以降低处理样品时的污染概率。然而,外旋盖的污染可能性相对较大,操作起来也不太方便,但准确度不高。内旋盖的液体容易沾到盖子螺纹上,而内旋管确实容易爆管(但概率极小),所以操作时需要格外小心。 内旋式冻存管 内旋式冻存管则用于液氮冻存生物样本。它的管口硅胶垫增强了冻存管的密封性,可以有效防止液氮渗入。内旋盖的设计使得管帽纹路易于旋转盖子,同时管帽与管身都采用相同批次和型号的PP原料生产,确保在任何温度下都能密封。此外,内旋式冻存管还有以下几个特点: 大面积的标记区域方便书写。 管体极为透明,易于观察样本。 圆形底部设计便于倾倒液体,减少残留。 通过这些特点,内旋式冻存管为液氮气相中冻存样品提供了更好的选择。无论是外旋还是内旋,选择合适的冻存管对于样本的保存和处理至关重要。
如何挑选适合的冻存管?一文搞定! 冻存管是生物研究和医学领域的重要工具,它们用于低温运输和储存组织或细胞样本。今天,我们来聊聊如何挑选一款优质的冻存管。 材质选择 ꊥ管通常由无细胞毒性的材料制成,常见的有塑料和玻璃。不过,玻璃材质的冻存管不能用于高速或超速离心机,所以聚丙烯材质的冻存管更为常见。聚丙烯具有良好的化学和温度稳定性,可以耐受零下187℃的低温。 构成部分 銥管通常由管帽和管体组成,分为内旋盖和外旋盖两种。如果样本需要在液氮气相中保存,建议使用带硅胶垫的内旋冻存管;如果样本需要放在冰箱等机械设备中保存,外旋冻存管是更好的选择,通常不带硅胶垫。 规格选择 根据实验需求,冻存管有0.5ml、1.0ml、2.0ml、5ml等不同规格。一般常用的生物样本冻存管是2ml的规格。需要注意的是,样本的容积一般不能超过冻存管容积的三分之二。 其他考虑因素 在选择冻存管时,还需要考虑双层与无双层、可立与不可立、国产与进口以及价格等因素。这些都会影响到使用体验和实验结果。 总结 挑选冻存管时,要综合考虑材质、构成、规格以及其他因素,确保选到最适合自己实验需求的冻存管。希望这篇文章能帮到你!
如何挑选一款优质的冻存管? 冻存管主要用于低温运输和储存组织或细胞样本,常见于生物研究和医学领域。以下是挑选优质冻存管的一些关键点: 材质选择ꊥ管通常由无细胞毒性的材料制成,实验室常用的材质有塑料和玻璃。由于玻璃材质的冻存管不能用于高速或超速离心机,因此聚丙烯塑料材质的冻存管更为常见。聚丙烯具有良好的化学和温度稳定性,能够耐低温至零下187℃。 结构考虑 冻存管一般由管帽和管体组成,分为内旋盖和外旋盖冻存管。如果样本需要在液氮气相中保存,建议使用带硅胶垫的内旋冻存管;如果样品需要放在冰箱等机械设备中保存,则建议使用外旋冻存管,一般不带硅胶垫。 规格匹配 根据实验需求,冻存管有0.5ml、1.0ml、2.0ml、5ml等规格。生物样本冻存管一般使用2ml规格。需要注意的是,样本的容积一般不能超过冻存管容积的三分之二,因此选择时需根据冻存样品量的大小来决定。 其他因素 除了材质和结构,冻存管还有双层和无双层、可立与不可立、国产和进口以及价格的区别。这些都是在选择冻存管时需要考虑的因素。 综上所述,挑选优质的冻存管需要综合考虑材质、结构、规格以及其他因素,以确保样本的安全储存和运输。
MSC实验室设备选型与操作流程设计指南 1. 젥ꌥ䇩型与操作流程设计 在MSC实验室中,选择合适的设备至关重要,以确保细胞制备过程的质量和一致性。核心设备包括生物安全柜、CO₂培养箱、离心机、细胞计数仪、冷冻存储设备(如液氮罐或超低温冰箱),以及用于无菌操作的专用耗材。选型时,要考虑设备的稳定性、易操作性和维护成本,并确保它们能满足GMP标准下的验证需求。设备布局需充分考虑操作流线,避免因设备摆放不当导致的污染或干扰。对于培养箱、生物安全柜等设备,建议设置多台冗余以应对设备故障。此外,操作流程设计需涵盖细胞的分离、扩增、冻存和复苏全过程,所有关键步骤应具有可追溯性,并配备实时监控与报警系统以降低失误风险。 实验室安全保障与合规设计 在间充质干细胞实验室的建设中,安全性和法规合规性是必须重视的。首先,实验室需取得生物安全相关认证(如BSL-2级或以上)以保障操作人员的健康安全,并设置完善的废弃物管理系统,妥善处理培养废液、污染耗材和生物废弃物,防止环境污染。其次,实验室需要符合GMP认证要求,确保干细胞制备过程符合药品生产质量管理规范。此外,实验室使用的人体组织样本或干细胞制品需获得伦理委员会批准,所有操作均需符合法律及伦理要求。最后,实验室的日常运行应有完整的操作规程(SOP),并定期进行人员培训和设备校准,以确保人员和设施始终处于最佳状态,保证产品的质量和安全性。
冻存管内旋和外旋盖的区别,你知道吗? 冻存管的内旋盖和外旋盖在设计和使用上有很大的区别。让我们一起来看看它们各自的特点吧! 内旋盖的设计特点 ꊥ 旋盖的冻存管是专为液氮冻存生物样本设计的。管口的硅胶垫增强了密封性,可以有效防止液氮渗入,确保样本的安全存储。 外旋盖的设计特点 外旋盖的冻存管则适用于冰箱中冻存样本。外旋盖的螺纹设计可以降低处理样品时的污染概率,确保实验的准确性。 内旋盖的优点 专为液氮冻存设计:内旋盖的冻存管适合在液氮气相中冻存样品。 增强密封性:管口的硅胶垫增加了冷冻管的密封性,防止液氮渗入。 易于旋转:管帽的纹路设计使得盖子易于旋转,方便操作。 材料一致性:管帽和管身采用相同批次和型号的PP原料生产,确保在任何温度下都能密封。 标记区域:大面积的标记区域方便书写,便于记录样本信息。 透明度高:管体极为透明,易于观察样本状态。 底部设计:圆形底部设计便于倾倒液体,减少残留。 外旋盖的优点 降低污染概率:外旋盖的螺纹设计可以减少处理样品时的污染几率。 方便处理:外旋盖的设计使得处理样品更加方便,提高工作效率。 通过这些特点,我们可以看到内旋盖和外旋盖各有千秋,适用于不同的实验需求。希望这篇文章能帮助你更好地了解冻存管的不同类型!
细胞培养实验室必备的10种仪器设备 细胞培养实验室需要哪些基本仪器设备呢?以下是一些必不可少的设备: 젦:倒置显微镜是细胞培养室的核心设备之一,用于观察细胞的生长情况和污染情况。 培养箱:细胞在体外培养时需要恒定的温度,通常最适温度为37℃,温差变化不应超过Ɒ.5℃。因此,需要能够控制温度的培养箱,如高灵敏度的恒温培养箱和CO2培养箱。 干燥箱:一些细胞培养器械和器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等需要进行干热消毒。 砦𐴧装置:细胞培养对水的质量要求很高,必须使用经过严格纯化处理的水。进行细胞培养时,配制各种培养液和试剂都需要使用三次蒸馏水,即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。 冰箱:细胞培养室必须配备冰箱,包括普通冰箱或冷藏柜,用于储存培养液、生理盐水等物品及短期保存组织标本;低温冰箱(-20℃),用于储存需要冷冻保存的生物活性制剂,如酶、血清等。 细胞冷冻储存器:常用的液氮容器,根据使用需要分为不同的类型和规格。选择时需考虑容积大小、取放方便性和液氮挥发量(经济性)。 离心机:进行细胞培养时,需要制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用实验室离心机。一般可常规配置4000rpm的国产台式离心机,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。 ⚖️ 天平:常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。 诼一般为高压蒸汽灭菌锅,直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。 미 滤器:细胞培养用液常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能,因此多采用滤过消毒以除去细菌。常用的滤器有玻璃滤器和微孔滤器,各种滤器有其使用原理和特点。 这些仪器设备是细胞培养实验室必不可少的,确保细胞的健康生长和实验的顺利进行。
液氮保存样本的诀窍与处理方法详解 液氮保存的奥秘 液氮保存技术以其独特的低温优势,成为了长期保存样本内细胞活性和组织器官复杂结构的首选方法。在-196℃的低温下,样本的生理和生化活动几乎完全停止,确保了样本的长期稳定性。 防止交叉污染 尽管液氮保存效果显著,但样本间的交叉污染仍是一个需要关注的问题。美国国家癌症研究所推荐使用带有螺旋盖和橡胶密封圈的冻存管来封装样本。然而,在从超低温冰箱(-80℃)转移到液氮中的过程中,冻存管可能会因骤然降温而收缩不一致,导致液氮渗入冻存管,增加交叉污染的风险。为了解决这一问题,可以使用专门的冻存管管套进行热缩密封,或者在冻存管管帽与管身接口处缠绕2-3圈密封膜。 렦无菌 尽管液氮不能消毒,但它可以降低细菌和病毒的活性。然而,这并不意味着液氮中的样本是无菌的。因此,研究者们开发了一种新的液氮保存方法——气相液氮罐,将样本置于液氮蒸气中。这种方法虽然避免了液体介质带来的交叉污染风险,但仍然存在致病菌和真菌生长的可能性。 选择合适的储存温度 选择合适的储存温度需要考虑样本的类型、预期储存时间、样本中生物分子的特性以及不同细胞的特性。一般来说,细菌和细胞的活性临界温度为-140℃,在这个温度下,所有的代谢活动都会停止。对于能够承受此温度的样本,建议选择低于这个温度进行储存,以利于长期稳定保存。对于不能承受-140℃的样本,通常选择-80℃进行储存。此外,经过特殊处理的样本可以在低温和室温条件下储存。 固体组织样本的储存 长期储存的新鲜冰冻组织和OCT包埋冰冻组织应储存于液氮中,而冰冻组织切片或用于DNA和RNA提取的冰冻组织则应储存在-80℃。经过福尔马林固定的石蜡包埋组织及组织切片应储存在室温,并控制虫患和湿度。 砦𝓦 𗦜짚储存 液体样本,包括血液和尿液,应在储存前分离各种成分,以确保每种成分在最佳条件下储存。全血、血清、血凝块、非淋巴细胞和血浆样本应储存在-80℃。血沉棕黄层和白细胞应储存在液氮中。尿液则应储存在-80℃或液氮中。
冷冻榴莲和新鲜榴莲有什么区别 最近大家有没有在超市的水果区徘徊,纠结到底买冷冻榴莲还是新鲜榴莲? 作为一个榴莲控,我也常常被这个问题困扰。今天就带大家来一探究竟,看看冷冻榴莲和新鲜榴莲到底有什么区别吧! 生产工艺和成熟度 冷冻榴莲采用的是液氮快速冷冻技术,这种方法可以确保榴莲在树上自然成熟后采摘,无需催熟,因此成熟度高。相比之下,新鲜榴莲一般在6-7成熟的时候采摘,然后通过催熟剂处理,成熟度相对较低。这个成熟度上的差异不仅影响了榴莲的口感,还影响了它的保存时间。 口感和气味 报𗥆口感可以说是绵密软糯,就像冰激凌一样甜腻,果肉在口中化开的感觉非常棒。而且冷冻榴莲的气味也相对较淡,没有那么浓烈。相比之下,新鲜榴莲则多汁软嫩,气味非常浓烈,独特的榴莲香味扑鼻而来,让人无法抗拒。每次开新鲜榴莲,我都感觉像开盲盒一样,买到的质量全靠运气。 保存时间和安全性 ⏳𗥆保存时间相当长,只要放在冰箱冷冻室中存放,可以保存一年之久。因为低温环境可以充分抑制榴莲中微生物的生长和繁殖。而新鲜榴莲就稍微逊色一些了,开果后需在24小时内食用,不然就会变质。如果是带壳的鲜果,通常能保存一周。不过要注意,鲜榴莲一旦裂开,就容易感染细菌,迅速变质。 所以,如果你想要享受绵密软糯的榴莲口感,又想保存时间更长,冷冻榴莲绝对是不二之选;而如果你喜欢多汁软嫩的口感,且不介意短时间内食用,那么新鲜榴莲也是一个不错的选择。 希望这篇文章能帮助你更好地选择适合自己的榴莲哦! 有什么疑问或者想法,欢迎在评论区和我互动~ 期待和大家一起讨论更多关于榴莲的有趣知识!
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