蛋白marker新上映_蛋白marker条带图(2024年12月抢先看)
赛维尔生物梯度制胶仪:WB老师的得力助手 各位做WB实验的老师们,你们是不是经常为配制蛋白胶而头疼?尤其是那些需要梯度分离的实验,手动配制不仅麻烦,还容易出错。别担心,赛维尔生物的梯度制胶仪来帮你解决这个问题! 梯度胶分辨率更高,分离效果更好 这款制胶仪可以配制4%-20%的各种浓度梯度胶,分辨率更高,对蛋白的分离效果也更好。比如,你可以看到10%等度胶和4-20%梯度胶的考染图,蛋白Marker(G2087)上样5,普通电泳缓冲液(G2018),90V电泳20分钟(上层胶),150V电泳35分钟(下层胶)。这样的条件下,梯度胶的分离效果和分辨率都非常出色。 操作简单,避免提前凝固 有时候手动配制蛋白胶,操作起来真的很麻烦,尤其是大量配制时,试剂很容易提前凝固。赛维尔生物的制胶仪可以设置简单的操作流程,试剂实时混匀,避免提前凝固,连续制胶也不在话下。 试剂盒价格亲民 𐊊配套的试剂盒价格也很亲民,248元/套,可以连续制胶约260块,每块胶的成本不到1元钱。而且只识别市面上常见的玻璃板,使用起来非常方便。 设备价格和购买优惠 𘊊这款制胶仪的价格是26000元,预存10万元还送仪器,性价比超高。对于那些经常需要配制蛋白胶的实验室来说,这绝对是一个福音。 总结 赛维尔生物的梯度制胶仪不仅操作简单,试剂盒价格亲民,而且可以连续制胶,避免了很多麻烦。对于那些需要梯度分离的实验来说,这款仪器简直是得力助手。赶紧试试吧!
蛋白Marker销售记 蛋白Marker 26617和26616在科研领域有着广泛的应用,尤其是26617,因其稳定性和可靠性备受青睐。许多科研课题组都会选择这款产品,每次备货时都会考虑10个、20个的数量。作为销售人员,了解这些大客户的需求至关重要。 把握客户需求:了解实验室做Western Blot的大客户,预测他们的备货时间点,并增加拜访频率。 订单小插曲:刚开始做销售时,有一次误将客户需要的10支26617理解为10盒,结果送货时闹了笑话。这提醒我们,沟通时一定要细致。 𑠥𝤺礸进口:随着国产OEM品牌的崛起,26617依然稳居市场,说明其市场需求稳定,且经销商认为有利润空间。 ᠩ售策略:了解客户的需求和习惯,提供定制化的服务,增加客户粘性。同时,注意售后服务,确保客户满意度。 市场份额:通过分析市场动态和竞争对手情况,制定合理的销售策略,争取更多的市场份额。
选PVDF膜秘籍 聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)是蛋白质印迹中常用的一种固相支持物。由于这种膜对蛋白质具有高亲和力,且具有较高的机械强度,因此非常适合于蛋白质转移和蛋白质印迹等应用,是蛋白分离与免疫检测的理想载体。那么,如何选择合适的PVDF膜呢?主要看两个方面:孔径大小和蛋白结合能力。 孔径大小 用于蛋白质免疫印迹实验(Western Blot,WB)的PVDF膜常用规格有两种:0.22um孔径和0.45um孔径。随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kDa的蛋白一般选用0.45um的膜,小于20kDa的蛋白则一般用0.22um的膜。由于0.22um的PVDF膜内部表面积大约是0.45的PVDF膜的三倍,因此其吸附能力更高。总之,研究者需要根据所研究蛋白的特性和大小来选择合适的PVDF膜孔径,以获得最佳的结合效果。 ꠨白结合能力 PVDF膜的蛋白结合能力越强,意味着蛋白质通过与膜接触发生的疏水作用而更加牢固地吸附在PVDF膜上。目前,像国外的Millipore、GE等公司都有蛋白结合性能不错的PVDF膜,但进口膜普遍价格偏高,很多实验室经费受限。好在现在很多国产PVDF膜也做得不错,例如BIOG的PVDF膜。 近期,我们实验室购入了两款PVDF膜。相同电转实验条件下,对比两个品牌的PVDF膜电转结果显示,蛋白marker的各条带均可被转到两款膜上,BIOG PVDF膜上的条带似乎更为清晰一些;观察膜后滤纸情况发现,左图部分蛋白分子已经透过某厂家的PVDF膜转移到滤纸上,而BIOG的PVDF膜则能更好地结合蛋白分子,使其保留在膜上。以上结果说明,BIOG这款PVDF膜的蛋白结合能力更强。当然,它的机械强度与坚韧度也是比较高的、耐热稳定性也不错。如果经常做WB实验的研究者,可以尝试一下。 ⚠️ 注意事项 PVDF膜具有高度疏水性,因此在浸入转印缓冲液之前必须先用甲醇浸湿来进行预处理。用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。 希望这些信息能帮助你选择到合适的PVDF蛋白免疫印迹膜,让你的实验更加顺利!
思科捷marker,科研神器! 最近发现了一个超好用的科研神器——思科捷蛋白marker!这可是朋友强烈推荐的,我已经复购好几次了,真的是爱不释手。 每次电泳结束,条带尺寸分布得特别合理,条带清晰锐利,最低只需上样量很少就能看出效果。相比之下,一些国产品牌的marker也还不错,但思科捷的这款真的让我眼前一亮。 如果你也在做科研,强烈推荐试试这款三色预染蛋白质Marker,13-250kDa的分子量范围,简直不要太方便!记得存放在-20Ⰳ,有效期到2025年11月,不用担心过期问题。 总之,这款marker真的是我科研路上的好帮手,强烈推荐给各位科研小伙伴们!
SDS-PAGE电泳及转膜全攻略 一、制胶 确定蛋白分子量,选择合适的SDS-PAGE胶浓度,并准备好灌胶模具。 分离胶的配置:按照配方加入试剂并混匀,过硫酸铵现配现用。缓慢倒入模具,覆盖乙醇液封,等待10-20分钟。 分离胶和乙醇层出现清晰界面时,倒掉乙醇。 浓缩胶的配置:按照配方加入试剂并混匀(避免气泡)。 将浓缩胶匀速倒入分离胶上方,避免气泡,插入梳子。 等待30分钟,凝胶聚合后放入4℃保存,可加入少量电泳液或水保持湿润。 二、上样与电泳 内槽加入1x电泳缓冲液,确保液体浸没凝胶上端和胶板底部导电孔。外槽加满电泳液。 样品与上样缓冲液按4:1比例混合,95℃-100℃加热5分钟。在同一片胶的孔中加入蛋白marker作为参照。 电泳开始时使用80V低电压,待溴酚蓝跑过浓缩胶后,加大电压至120V。待marker显示的目标蛋白与其他蛋白明显分离时停止电泳。 三、转膜 根据胶的大小剪PVDF膜和滤纸,放入转膜缓冲液中平衡5分钟。 组装转膜夹:红色朝下—海绵垫—滤纸—膜—胶—滤纸—海绵垫,夹紧后放入转移槽。 加转膜缓冲液,将转移槽置于冰中。根据蛋白分子量确定转膜的电压、电流、时间。 转膜结束后,切断电源,取出PVDF膜。 四、封闭与免疫杂交 将膜置于封闭缓冲液中,室温封闭2小时。 加入稀释过的一抗,室温孵育1-2小时或4℃过夜。 用TBST洗膜。 加入稀释过的二抗,室温孵育1小时。 TBST洗膜。
史上最全WB实验操作及原理讲解③ Western Blot 实验通常使用SDS-PAGE进行电泳,根据目的蛋白的分子量选择合适的凝胶浓度。以10%的SDS-PAGE自制胶为例,以下是详细的操作步骤和注意事项: 制备凝胶 ꊨㅩ 好灌胶的模具,按照配方配置分离胶(适量的丙烯酰胺溶液、10% SDS、分离胶缓冲液),加入适量的过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌(不要产生气泡)后缓慢加入到模具中。再在页面上小心注入一层水,以阻止氧气进入凝胶溶液中,静置40分钟。待凝胶聚合后,分离胶和水层出现一个清晰的界面,吸尽分离胶上的水。 同样按比例配置浓缩胶(浓缩胶浓度较分离胶低),缓慢加入分离胶的上面,直至灌满。将梳子插入凝胶内,注意不得在梳子齿尖留有气泡,静置60分钟以上待凝胶聚合后拔出梳子。 注意事项及原理 分离胶浓度:不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,所以Western Blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 过硫酸铵和TEMED的量:聚丙烯酰胺(PAGE)是由丙烯酰胺聚合形成的高分子,这个聚合反应是自由基聚合,需要有引发剂产生自由基将反应引发。过硫酸铵(AP)就是引发剂,而TEMED(四甲基乙二胺)可以催化过硫酸铵产生自由基,催化聚丙烯酰胺单体聚合成网状结构。但是两者的量一定适宜,否则会有烧胶或带变形的可能。 加入一层水:在注入分离胶后上面需要加入一层水,这是因为空气中的氧分子会氧化AP使其活性减弱。加入这层水后可以让反应快速进行,同时也保证了分离胶上层面的平整。 加样 犥🃦出梳子,将制好的凝胶及玻璃板放入电泳槽内并组装好。将电泳缓冲液加入内外槽,使凝胶的上下两端均能浸泡在电泳缓冲液中。将待测蛋白样品与上样缓冲液按比例混合,沸水中加热3-5分钟使蛋白充分变性。将样品加入到凝胶孔中,同时必须在同一片胶的孔中加入蛋白marker作为参照。加样时间要尽量短,以免样品扩散。 电泳 当样品上样并接通两极间电流后(电泳槽的上方为负极,下方为正极),在凝胶中形成移动界面并带动凝胶中所含SDS负电荷的多肽复合物向正极推进。电泳时通常上层浓缩胶时采用低电压(80-100V)恒压电泳,而在溴酚蓝进入下层分离胶时采用高电压(120V)恒压电泳。溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端时停止电泳。电泳完毕的胶完整地放在盛有电泳液的玻璃皿中,将目的蛋白所在区域切下来。 持续更新,敬请关注~
爱博泰克分子生物学产品使用心得 在进行Western blot实验时,我尝试了爱博泰克(abclonal)的蛋白marker、抗体(一抗、二抗)和抗体稀释液等产品。与之前使用过的其他品牌相比,爱博泰克的产品在实验结果上表现更佳。 蛋白marker:使用3ul的爱博泰克蛋白marker,条带清晰且无杂带,蛋白胶上的条带非常直且干净。 抗体:一抗和二抗的特异性较高,能够有效地识别目标蛋白,实验结果更为准确。 体稀释液:使用爱博泰克的抗体稀释液,能够更好地调节抗体浓度,确保实验结果的稳定性。 总的来说,爱博泰克的分子生物学产品在使用体验上给我留下了深刻印象,特别是在Western blot实验中,其产品表现出了卓越的性能。我强烈推荐使用爱博泰克的相关产品。
쨁丙烯酰胺凝胶电泳检测技巧 蛋白质纯度鉴定,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳来帮忙!这是最简单、成本低的检测方法,灵敏度高,能轻松确定样品中蛋白质组分数目。 ᠥ쥎理:聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),以聚丙烯酰胺凝胶为支持介质,利用电泳分离蛋白质。凝胶机械强度好,稳定透明,是理想的电泳支持物。 实验步骤来啦: 1️⃣ 制胶:根据蛋白大小,选择合适浓度的胶,蛋白小选高浓度,蛋白大选低浓度。 2️⃣ 加样、电泳:胶凝固后,加入蛋白marker和待测蛋白,倒入电泳缓冲液,接通电源开始跑胶。 3️⃣ 染色、脱色:等溴酚蓝跑到胶末端,关闭电源,去除浓缩胶,分离胶放入考马斯亮蓝染色液中染色40分钟,再放入脱色液中脱色1小时。 4️⃣ 结果解读:根据Marker判断蛋白大小,看有无杂带判断纯度,用BSA标准品制作标曲,计算目的蛋白浓度。 样品要求:浓度>0.5ug/ul,体积>50ul,含盐量≤20mM。 젩择实验方法时,考虑是否需要还原剂。还原性-SDS-PAGE检测含还原剂上样缓冲液,非还原性-SDS-PAGE则不含。 ᠥ㫯丙烯酰胺凝胶电泳是蛋白质纯度鉴定的好帮手,掌握技巧,轻松上手!
李记三色Marker,电泳转膜神器! 今天要给大家介绍的是李记生物的超级产品——三色预染蛋白marker(10-180kd)!这可是电泳和转膜的好帮手哦! 产品亮点 这个三色预染蛋白marker包含了从10KD到180KD的10种高度纯化的重组蛋白质,每种都带有His标签。特别的是,70KD的条带是橙红色的,10KD的是绿色的,其他的都是蓝色的。这样的颜色分布让你在SDS-PAGE和Western blot中都能轻松识别。 使用方法 ꊨ🙤𘪥𝩨染蛋白marker已经配好了1㗓DS-PAGE上样缓冲液,直接用就行,不用煮沸、稀释,也不用加还原剂处理。上样时,根据上样孔的大小,每次5~10就足够了。电泳时、电泳后和转膜后,你都能看到非常清晰的蛋白条带。 运输与保存 ❄️ 运输时要用蓝冰,确保温度控制在4℃,这样可以短期保存2个月。如果需要长期保存,可以放到-20℃,有效期长达36个月。 总结 李记生物的三色预染蛋白marker真的是电泳和转膜的好帮手,颜色清晰,使用方便,保存也简单。无论是短期还是长期,都能保证你的实验顺利进行。赶紧试试吧!
小分子蛋白WB,这样跑! 有小伙伴问我,小分子蛋白的Western Blot怎么跑。作为一个经常跑15KD、12KD、20KD蛋白的老手,我来分享一些我的小经验吧。 选择合适的聚丙烯酰胺凝胶 ꊩ择对的胶是关键!小分子蛋白的marker千万别跑到胶的最下面。比如,你要跑12KD的蛋白,选择10KD和15KD、20KD分得开的胶会更好。如果最下面的两个marker挨得太紧,比如10KD和15KD,那你孵育10~15KD的蛋白可能效果不好。一般来说,15以内的小分子蛋白尽量选15%或者13.5%的胶。 浓缩胶长一点更好 跑小分子蛋白时,浓缩胶长一点效果会更好。自己配胶的小伙伴可以把浓缩胶配得长一点。进入分离胶后不要立马调电压,等marker更明显一些再调电压。分离层调电压不要太高,小分子低电压跑。85V浓缩,让蛋白在浓缩胶里更聚集一些;130V分离,非小分子蛋白我一般用150V。 上样量要足 犨𗑥子蛋白时,上样量要比平时多一点。一般跑胶20~30ug足够,跑小分子蛋白上30~40ug,根据自己的目的蛋白调整。尽量使蛋白浓度高,上样体积小。用1.5mm的板跑小分子蛋白,条带成功率更大。 转膜技巧 小分子蛋白转膜最好用0.22um的PVDF膜。0.22um的膜不用担心转过,小分子大分子可以一起转也没问题。如果要用0.45um的膜转小分子蛋白,记住一个原则:理论上1KD转1min,再比理论上多10min即可,转太久容易丢失蛋白信号。例如:15KD的蛋白,可以85V恒压或350mA恒流转30min。封闭正常封闭即可,封闭完可以洗10min再敷一抗。 敷一抗 保证抗体好用,增加孵育时间。我一般过夜孵育14小时。 希望这些小技巧能帮到大家!如果有更多问题,欢迎在评论区继续讨论哦!
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